XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細胞

產(chǎn)品規格CAT#: BFNC86009-01(10×100ul)/BFNC86009-02(50×100ul)

XL1-Blue MRF` Kan:                                     100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                       10μl

保存條件（保質(zhì)期）：                           -80℃（6個(gè)月）

基因型

?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F′proAB lacIqZ?M15 Tn5 (Kan^R)]

產(chǎn)品說(shuō)明

XL1-Blue MRF’Kan菌株來(lái)源于XL1-Blue株系，是限制酶系統缺失型[?(mcrA)183, ?(mcrCB-hsdSMR -mrr)173],，且具有卡那霉素抗性 (Kan^R)，可轉化具有氯霉素或四環(huán)素抗性的質(zhì)粒。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失，增強了外源DNA的穩定性和提取質(zhì)量。 lacI^qZΔM15 的存在使XL1-Blue MRF’Kan菌株可用于藍、白斑篩選。

青旗生物生產(chǎn)的XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉化效率>10⁸ cfu/μg DNA。

XL1-Blue MRF` Kan化學(xué)感受態(tài)細胞

操作方法

1. XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA并用手bo打EP管底充分混勻，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì )降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或

LB培養基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養箱過(guò)夜培養。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞適宜在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(cháng)，長(cháng)時(shí)間存放會(huì )降低轉化效率。

2. XL1-Blue MRF’Kan感受態(tài)細胞具有卡那霉素抗性，不可轉化具有卡那霉素抗性的質(zhì)粒。

3. 轉化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。