白介素elisa試劑盒的實(shí)驗原理是用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

 

　　白介素elisa試劑盒的實(shí)驗步驟：

　　1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在白介素elisa試劑盒酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

　　2、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

　　3、配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　4、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

　　5、溫育：操作同3。

　　6、洗滌：操作同5。

　　7、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

　　8、終止：每孔加終止液50μl，終止反應。

　　9、測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

　　10、計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn)，根據樣品的OD值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shí)際濃度。